الٽرا HiFidelity PCR ڪٽ

اعليٰ وفاداري ، اعليٰ خصوصيت ۽ اعليٰ ڪارڪردگي وارو گرم شروع PCR premix.

الٽرا هائي فائيڊليٽي پي سي آر ڪٽ هڪ نئون اعليٰ مخلصي وارو پي سي آر وlائڻ وارو پريمڪس آهي جيڪو پي سي آر سان لا clاپيل ڪلوننگ ۽ ectionولڻ لاءِ موزون آهي. ڪٽ ۾ شامل الٽرا هائي فائي ڊي اين اي پوليميرس ھڪڙو نئون تيز ۽ اعليٰ مخلص ڊي اين اي پوليميرس آھي جيڪو تيار ڪيل ماليڪولر ارتقائي ٽيڪنالاجي پاران تيار ڪيو ويو آھي. اھو و DNAائيندو آھي ڊي اين اي پوليميرس جو تعلق ٽيمپليٽس سان ، وا improvesاري جي رفتار ۽ انزائم جي وا extensionاري جي صلاحيت ، ۽ وRائي ٿو PCR ۽ پيداوار جي ڪاميابي جي شرح.

لي. نه پيڪنگ سائيز
4992970 1 ml
4992971 5*1 ملي
4992978 5*5*1 ml

 

 


پيداوار جي تفصيل

تجرباتي مثال

سوال

پيداوار ٽيگ

خاصيتون

operate هلائڻ ۾ آسان: ھي کٽ 2 × پريمڪس طور ڏني وي ٿي ، ۽ PCR انجام ڏئي سگھجي ٿو ر simplyو ٽيمپليٽس ۽ پرائمر شامل ڪري.
■ اعليٰ وفاداري: وفاداري تق پوليميرس جي timesيٽ ۾ 50 يرا آهي.
■ اعلي خاصيت: بهترين گرم شروع ڪارڪردگي ڪارڪردگي يقيني پيداوار لاءِ.
amp تيز رفتار وlائڻ: توسيع جي رفتار 10-15 سيڪنڊ/ڪلو تائين پهچي سگھي ٿي.
ext مضبوط توسيع: 20 kb تائين ڊي اين اي جا ٽڪرا وائي سگھجن ٿا.
applic وسيع قابل اطلاق: ڪٽ تي مشتمل آھي PCR Enhancer ۽ مناسب آھي GC ۽ پيچيده ٽيمپليٽس جي واl لاءِ.

خاصيت

قسم: هاءِ مخلص ڊي اين اي پوليميرس
و speedائڻ جي رفتار: 10-15 سيڪنڊ/ڪلو
ٽڪرا سائيز: <20kb
اپليڪيشن: هاءِ فڊليٽي PCR امپليفيشن ، جين ڪلوننگ ، هاءِ GC ٽيمپليٽ ايمپليفيشن ، پيچيده جينوومز جي جين ڪلوننگ ، سي ڊي اين اي هاءِ فڊليٽي ايمپليفيشن ، SNP ectionولڻ ، سائيٽ مخصوص ميوٽيشن ، وغيره.
ڊي اين اي ڪractionڻ جي پيداوار مختلف ntوٽن جي بافتن مان:
نوٽ: ڊي اين اي جي پيداوار انحصار ڪري ٿي نموني جي قسمن تي. مٿي ڏنل سئي مواد نرم پنن مان آهن.

س Allئي شيون ODM/OEM لاءِ ڪسٽمائيز ٿي سگھن ٿيون. تفصيل لاءِ ،مھرباني ڪري ڪلڪ ڪريو ڪسٽمائيز سروس (ODM/OEM)


  • ا Previousيون:
  • ا Nextيون:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example مصنوعات جي خاصيت کي يقيني بڻائڻ لاءِ گرم شروع
    شڪل 1. الٽرا هائي فائي وٽ آھي شاندار گرم شروع ڪرڻ جو فنڪشن يقيني بڻائڻ لاءِ و ampائڻ واري شين جي خاصيت. Molecular beacons method لا wasو ڪيو ويو (Ma et al. ، Anal Biochem ، 2006).
    Experimental Example تمام اعليٰ ايمانداري ، تق پوليميرس کان 50 higherيرا ويڪ
    شڪل 2. الٽرا هائي فائي جي وفاداري عام طاق پوليمريز جي 50يٽ ۾ 50 higherيرا ويڪ آھي. تق پوليمريز جي پوليمرائزيشن وفاداري (بغير اصلاحي سرگرمي جي) بطور حوالو استعمال ٿئي ٿي.
    Experimental Example تيزيءَ سان وlائڻ ۽ ڊگھي ٽڪرن کي تيز ڪري سگھجي ٿو
    تصوير 3. الٽرا HiFi و secائي سگھي ٿو 5 سيڪنڊ/kb تائين 4 kb کان نن smallerن ٽڪرن لاءِ. ڊگھي ٽڪرن لاءِ ، وlائڻ جو وقت مناسب طور تي وائي سگھجي ٿو. 15 kb کان و fragيڪ ٽڪرن لاءِ ، حد رفتار 30 سيڪنڊ/kb تائين ٿي سگھي ٿي. M: TIANGEN D15000 مارڪر
    Experimental Example Experimental Example Experimental Example مضبوط عالمگيريت ۽ اعليٰ خصوصيت ، پڙھڻ ۾ آسان GC ۽ ڊگھو ٽڪرا مختلف ذريعن کان
    شڪل 4. الٽرا هائي فائي وٽ اعليٰ خصوصيت آھي يقيني بڻائڻ لاءِ امپليفيشن ڪاميابي جي شرح ۽ مختلف مقدار جي ٽيمپليٽس لاءِ پراڊڪٽ جي مقدار.
    الف الٽرا هائي فائي واlاري جا نتيجا
    B. هائي فائي اينزائم وlائڻ جا نتيجا فراهم ڪندڙ K
    C. هائي فائي اينزائم وlائڻ جا نتيجا فراهم ڪندڙ N
    M: TIANGEN D15000 مارڪر
    لين 1-5. ٽيمپليٽس جي و lengthائڻ جا نتيجا مختلف ڊگھائي سان: 1. 750 bp 2. 1 kb 3.
    2 ڪلو؛ 4. 4 kb 5. 6 kb
    لين 6. اعليٰ GC ٽيمپليٽ جو وائڻ جو نتيجو: 1915 bp (GC٪: 70٪)
    لين 7-11. و genائڻ جو نتيجو 2 kb ٽيمپليٽس مختلف جينوم مان: 7. چوٿون؛ 8.
    چانور؛ 9. ڪڻڪ؛ 10. مکڻ؛ 11. بيڪٽيريا
    لين 12-14. 8 kb ڊگھو ٽڪرو وlائڻ جو نتيجو: 12. چانور 13. مکڻ؛
    سوال: ڪوبه وlائڻ وارو بئنڊ ناهي

    A-1 سانچو

    ■ ٽيمپليٽ تي مشتمل آھي پروٽين جون نجاستون يا Taq inhibitors.

    template ٽيمپليٽ جي atاھڻ مڪمل نه آھي —— مناسب طور تي وatايو وatي atاھڻ جي درجه حرارت ۽ ڊگھو atاھڻ جو وقت.

    ■ ٽيمپليٽ خراب ڪرڻ the ٽيمپليٽ -يهر تيار ڪريو.

    A-2 پرائمر

    pri پرائمر جي ناقص معيار e پرائمر کي -يھر ھرايو.

    ■ پرائمر تباھي —— اعلي ڪنسنٽريشن پرائمر کي بچايو نن smallي مقدار ۾. گھڻن منجمد ۽ پگھلڻ کان پاسو ڪريو يا ڊگھي عرصي تائين 4 ° C cryopreserved.

    pri پرائمر جي نامناسب ڊيزائن (مثال طور پرائمر جي ڊيگھ ڪافي ناھي ، پرائمر جي وچ ۾ imeھيل ڊيمر وغيره) -ري ڊيزائين پرائمر (پرائمر ڊيمر ۽ سيڪنڊري ساخت جي avoidاھڻ ​​کان پاسو ڪريو)

    A-3 مگ2+توجه

    ■ مگ2+ ڪنسنٽريشن تمام گھٽ آهي ro خاص طور تي Mg و increaseايو2+ ڪنسنٽريشن: ايم پي کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.

    A-4 انيلنگ جو گرمي پد

    ■ تيز annealing گرمي پد کي متاثر ڪري ٿو پرائمر ۽ ٽيمپليٽ جي پابند. -انيلنگ جي درجه حرارت کي گھٽايو ۽ حالت کي بهتر ڪريو 2 ° C جي درجه بندي سان.

    A-5 وensionائڻ جو وقت

    ■ مختصر توسيع وقت extension و extensionائڻ جو وقت وايو.

    سوال: ڪوڙو مثبت

    Phenomena: منفي نمونا پڻ ڏيکارين ٿا ٽارگيٽ تسلسل بينڊ.

    PCR جي A-1 آلودگي

    target ٽارگيٽ تسلسل يا وlائڻ وارين شين جي پار آلودگي fully احتياط سان پائپ نه ڪيو و targetي ٽارگيٽ تسلسل وارو نمونو منفي نموني ۾ يا انھن کي اrليو سينٽرفيوج ٽيوب مان. ريجينٽس يا سامان پاڻمرادو beھيل ھئڻ گھرجي موجوده نيوڪليڪ ايسڊز کي ختم ڪرڻ لاءِ ، ۽ آلودگيءَ جو وجود منفي ڪنٽرول تجربن ذريعي طئي ٿيڻ گھرجي.

    ■ Reagent contamination liAliquot reagents ۽ اسٽور گھٽ درجه حرارت تي.

    A-2 وزيراعظمr

    ■ مگ2+ ڪنسنٽريشن تمام گھٽ آهي ro خاص طور تي Mg و increaseايو2+ ڪنسنٽريشن: ايم پي کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.

    ■ نامناسب پرائمر ڊيزائن ، ۽ ٽارگيٽ تسلسل ۾ ھومولوجي آھي غير ھدفاتي تسلسل سان. -designيهر ڊيزائين ڪرڻ وارا پرائمر.

    عبرت: غير مخصوص وlائڻ

    Phenomena: PCR amplification bands متضاد آھن متوقع سائيز سان ، يا ته وڏا يا نن ،ا ، يا ڪڏهن ڪڏهن specificئي مخصوص امپليفيشن بينڊ ۽ غير مخصوص امپليفيشن بينڊ.

    A-1 پرائمر

    pri غريب پرائمر جي خاصيت

    -designيهر ڊيزائين ڪرڻ وارو پرائمر.

    ■ پرائمر جو ڪنسنٽريشن تمام گھڻو آھي ro مناسب طور تي وatايو وatي ڊيناتريشن جي درجه حرارت ۽ ڊگھو ڪرڻ وارو وقت.

    A-2 مگ2+ توجه

    Mg مگ2+ ڪنسنٽريشن تمام گھڻي آھي —— خاص طور تي Mg2+ ڪنسنٽريشن گھٽ ڪريو: Mg کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.

    A-3 Thermostable polymerase

    en ضرورت کان وzyيڪ انزائم جي مقدار en گھٽايو اينزيم جي مقدار کي مناسب طور تي 0.5 U جي وقفي تي.

    A-4 انيلنگ جو گرمي پد

    ■ annealing گرمي پد تمام گھٽ آهي —— مناسب طور annealing گرمي پد و orائڻ يا adoptه-اسٽيج annealing طريقو اپنائڻ.

    A-5 PCR سائيڪلون

    many تمام گھڻا PCR چڪر PC PCR سائيڪلن جو تعداد گھٽايو.

    سوال: پيچيده يا سمير بينڊ

    A-1 پرائمرoor ناقص خاصيت the پرائمر کي -يهر ڊيزائين ڪرڻ ، پرائمر جي پوزيشن ۽ ڊيگھ تبديل ڪرڻ ان جي خاصيت و enhanceائڻ لاءِ يا نسٽ ٿيل PCR انجام ڏيو.

    A-2 سانچو DNA

    template ٽيمپليٽ خالص ناهي the ٽيمپليٽ کي صاف ڪريو يا ڊي اين اي ڪ purو صاف ڪرڻ جي ڪٽس سان.

    A-3 مگ2+ توجه

    —— ايم جي2+ ڪنسنٽريشن تمام گھڻي آھي Mg خاص طور تي Mg گھٽايو2+ ڪنسنٽريشن: ايم پي کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.

    A-4 dNTP

    - ڊي اين ٽي پيز جو ڪنسنٽريشن تمام گھڻو آھي - ڊي اين ٽي پي جو ڪنسنٽريشن مناسب طور تي گھٽ ڪريو

    A-5 انيلنگ جو گرمي پد

    oo تمام گھٽ annealing گرمي پد rop مناسب طور annealing گرمي پد ۾ اضافو

    A-6 سائيڪلون

    many تمام گھڻا چڪر cycle سائيڪل نمبر کي وايو

    سوال: 50 μl PCR رد عمل واري نظام ۾ ڪيترو ٽيمپليٽ ڊي اين اي شامل ڪيو وي؟
    ytry
    سوال: ڊگھي ٽڪرن کي ڪيئن وايو وي؟

    پهريون قدم آهي مناسب پوليميرس چونڊڻ جو. باقائده Taq پوليميرس 3'-5 'exonuclease سرگرمي جي کوٽ جي ڪري پروف ريڊ نٿو ٿي سگھي ، ۽ بي ترتيب ٽڪرن جي توسيع ڪارڪردگيءَ کي تمام گھٽ ڪندو. ان ڪري ، باقاعده Taq polymerase مؤثر طريقي سان ٽارگيٽ ٽڪرن کي وlائي نٿو سگھي 5 kb کان وڏو. Taq polymerase خاص ترميم سان يا highيو اعليٰ مخلص پوليمريز چونڊيو و beي ته جيئن وا extensionاري جي ڪارڪردگيءَ کي بھتر ڪري سگھجي ۽ ڊگھي ٽڪرا وlائڻ جي ضرورتن کي پورو ڪيو وي. ان کان علاوه ، ڊگھن ٽڪرن جي واl ويجھ لاءِ پڻ ضرورت آھي پرائمر ڊيزائن جي مناسب ترتيب ، ڊيناتوريشن ٽائيم ، ايڪسٽينشن ٽائيم ، بفر پي اي، ، وغيره. ٽيمپليٽ جي نقصان کي روڪڻ لاءِ ، 94 ° C تي atاھڻ جو وقت گھٽايو و 30ي 30 سيڪنڊ يا گھٽ في چڪر ۾ ، ۽ وقت و temperatureائڻ جو وقت 94 ° C تائين و ampڻ کان ا should 1 منٽ کان گھٽ ھجڻ گھرجي. ان کان علاوه ، و extensionائڻ جو گرمي پد تقريبا 68 68 ° C تي ۽ و extensionائڻ جو وقت kاھڻ 1 kb/منٽ جي شرح مطابق ڊگھي ٽڪرن جي اثرائتي ور ensure کي يقيني بڻائي سگھي ٿو.

    سوال: پي سي آر جي وlائڻ واري ايمانداري کي ڪيئن وايو وي؟

    پي سي آر وlائڻ جي غلطي جي شرح کي گھٽ ڪري سگھجي ٿو مختلف ڊي اين اي پوليميرس استعمال ڪري و highيڪ ايمانداري سان. ا allا تائين مليل س Taني طاق ڊي اين اي پوليميرسز مان ، پي ايف يو انزائم وٽ گھٽ ۾ گھٽ غلطي جي شرح ۽ س highest کان و fيڪ ايمانداري آھي (ڏسو جدول ڏسو). انزائم جي چونڊ کان علاوه ، محقق و PCيڪ گھٽ ڪري سگھن ٿا PCR ميوٽيشن جي شرح کي بهتر ڪندي رد عمل جي حالتن کي ، بشمول بفر جي جوڙجڪ کي بهتر ڪرڻ ، ٿرموسٽبل پوليميرز جي توسيع ۽ PCR سائيڪل نمبر کي بھتر ڪرڻ.

    پنھنجو پيغام ھتي لکو ۽ اھو اسان ڏانھن موڪليو