TGuide S96 بلڊ/سيل/ٽشوز آر اين اي کٽ

A-1 سيل lysis يا homogenization ڪافي ناهي

---- نموني جي استعمال کي گھٽ ڪريو ، ليسس بفر جي مقدار و increaseايو ، وomايو homogenization ۽ lysis وقت.

A-2 نموني جي رقم تمام وڏي آھي

---- استعمال ٿيل نموني جي مقدار کي گھٽايو يا ليسس بفر جي مقدار کي وايو.

A-1 نامڪمل سيل ليسس يا هڪجهڙائي

---- نموني جي استعمال کي گھٽ ڪريو ، ليسس بفر جي مقدار و increaseايو ، وomايو homogenization ۽ lysis وقت.

A-2 نموني جي رقم تمام وڏي آھي

---- مهرباني ڪري و refer ۾ و processing پروسيسنگ جي گنجائش جو حوالو ڏيو.

A-3 RNA مڪمل طور تي ڪالمن مان نھ ڪيو ويو آھي

---- RNase-free پاڻي شامل ڪرڻ کان پوءِ ، ان کي ڪجھ منٽن لاءِ leaveڏي و beforeو سينٽرفيوگ ڪرڻ کان پھريائين.

اي -4 ايٿانول آلودگي ۾

---- rوئڻ کان پوءِ ، centيهر سينٽرفيوج ڪريو ۽ washingوئڻ واري بفر کي جيترو ٿي سگھي هٽايو.

A-5 سيل ڪلچر ميڊيم مڪمل طور تي نه هٽايو ويو آهي

---- جڏھن سيل گڏ ڪندا ، مھرباني ڪري پڪ ڪريو ته ڪلچر ميڊيم کي جيترو ممڪن ٿي سگھي ختم ڪريو.

A-6 سيلز جيڪي RNAstore ۾ محفوظ ٿيل آھن سي مؤثر انداز ۾ سينٽرفيوج ٿيل ناھن

---- RNAstore کثافت اوسط سيل ڪلچر ميڊيم کان ويڪ آھي ان ڪري مرڪزي قوت کي و beايو وي. اهو تجويز ڪيو ويو آهي ته 3000x g تي سينٽرفيوج ڪيو وي.

A-7 گھٽ RNA مواد ۽ نموني ۾ ڪثرت

---- استعمال ڪريو ھڪڙو مثبت نمونو طئي ڪرڻ لاءِ ته yieldا گھٽ پيداوار پيدا ٿئي ٿي نموني جي ڪري.

A-1 مواد تازو ناهي

---- تازي بافتن کي ذخيرو ڪيو و liquidي مائع نائيٽروجن ۾ فوري طور تي يا فوري طور تي آر اين اسٽور ريجنٽ ۾ وجھو ته جيئن نڪتل اثر يقيني ٿئي.

A-2 نموني جي رقم تمام وڏي آھي

---- نموني جي رقم گھٽايو.

A-3 RNase آلودگيn

---- جيتوڻيڪ ڪٽ ۾ مهيا ڪيل بفر ۾ RNase ڪونھي ، اھو آسان آھي RNase کي ڪctionڻ جي عمل دوران ۽ احتياط سان سن beاليو وي.

A-4 اليڪٽرروفورسس آلودگي

---- اليڪٽرروفورسس بفر کي تبديل ڪريو ۽ پڪ ڪريو ته استعمال ٿيندڙ شيون ۽ لوڊنگ بفر RNase آلودگي کان پاڪ آھن.

A-5 electrophoresis لاءِ تمام گھڻي لوڊشيڊنگ

---- نموني لوڊ ڪرڻ جي مقدار کي گھٽايو ، ھر کوھ جي لوڊشيڊنگ 2 μg کان و notيڪ نه ٿيڻ گھرجي.

A-1 نموني جي رقم تمام وڏي آھي

---- نموني جي رقم گھٽايو.

A-2 ڪجھ نمونن ۾ اعلي DNA مواد آھي ۽ DNase سان علاج ڪري سگھجن ٿا.

---- انجام ڏيو RNase- مفت DNase علاج حاصل ڪيل RNA حل ڏانھن ، ۽ RNA س directlyو سنئون علاج کانپوءِ ايندڙ تجربن لاءِ استعمال ڪري سگھجي ٿو ، يا وNAيڪ پاڪ ڪري سگھجي ٿو RNA صاف ڪرڻ واري کٽ ذريعي.

شيشي جي سامان لاءِ ، پڪل 150 ° C تي 4 ڪلاڪن لاءِ. پلاسٽڪ جي ڪنٽينرن لاءِ ، 0.5 M NaOH ۾ 10 منٽن لاءِ غرق ڪيو ويو ، پوءِ چNيءَ طرح RNase- پاڪ پاڻيءَ سان insوئي thenڏيو ۽ پوءِ RNase کي مڪمل طور ختم ڪرڻ لاءِ جراثيم ڪش ڪريو. تجربن ۾ استعمال ٿيندڙ ريجنٽ يا حل ، خاص طور تي پاڻي ، RNase کان پاڪ هجڻ گھرجي. استعمال ڪريو RNase کان پاڪ پاڻي س allني ري ايجينٽ تيارين لاءِ (پاڻي شامل ڪريو ھڪڙي صاف شيشي جي بوتل ۾ ، DEPC کي 0.1 سيڪڙو جي آخري ڪنسنٽريشن ۾ شامل ڪريو (V/V) ، رات جو ٿڪايو ۽ آٽو ڪلييو).