■ تيز وlائڻ جي ڪارڪردگي: مختلف سائز جا ڊي اين اي ٽڪڙا (5 kb کان گھٽ) ۽ ذريعن کي موثر طريقي سان وائي سگھجي ٿو.
sensitivity اعليٰ حساسيت: جيترو گھٽ 10 pg ھدف جا ٽڪرا جينومڪ ٽيمپليٽس مان وائي سگھجن ٿا.
stress اعليٰ د resistanceاءَ جي مزاحمت: اھڙن ٽيمپليٽس لاءِ جن ۾ اعليٰ ناپاڪ مواد ھجي جيئن خراب ڪ extractيل ٽيمپليٽ/بيڪٽيريا ڪلچر ، ھدف وارو ٽڪرو آسانيءَ سان وlائي سگھجي ٿو. پوليميرس سرگرمي متاثر نه ٿيندي بار بار ٿzingڻ ۽ hawرڻ سان.
applications ايپليڪيشنن لاءِ آسان: رد عمل جو نظام آساني سان ۽ جلدي تيار ڪيو ويو. وlايل ٽڪڙي تي مشتمل آھي 3-end dA-overhang ، جيڪو TA ڪلوننگ لاءِ آسان آھي.
قسم: Taq DNA polymerase
نمونو: صاف ٿيل/خراب ڪ extractيل ٽيمپليٽ/بيڪٽيريا ڪلچر
سانچو: > 10 ص
ٽڪرا سائز: <5 kb
ايپليڪيشنون: PCR و DNAائڻ ڊي اين اي ٽڪرن جو ، ڊي اين اي ليبلنگ ، پرائمر ايڪسٽينشن ، تسلسل جو تعين ، وڏي پيماني تي جين جي سectionاڻپ ، نيم مقدار وارو PCR تجربا ، ٽريس ڊي اين اي جي سectionاڻپ ، وغيره.
س Allئي شيون ODM/OEM لاءِ ڪسٽمائيز ٿي سگھن ٿيون. تفصيل لاءِ ،مھرباني ڪري ڪلڪ ڪريو ڪسٽمائيز سروس (ODM/OEM)
شڪل 1. مختلف ذريعن کان ٽيمپليٽ و ampايا ويا TIANGEN Taq MasterMix II ۽ عام Taq Mix پاران سپلائر TR پاران ترتيب وار ريجنٽس جي د stressاءَ واري مزاحمت کي معلوم ڪرڻ لاءِ. نتيجا ظاھر ڪن ٿا ته TIANGEN پروڊڪٽس ٽارگيٽ ٽڪرن کي وudeائي سگھن ٿا خام جينومڪ ٽيمپليٽس ۽ بيڪٽيريا ڪلچر کان ، ۽ د resistanceاءُ جي مزاحمت سپلائر TR جي betterيٽ ۾ بھتر آھي. A: خام جينومڪ ٽيمپليٽ ڪ extractيو ويو TIANGEN TIANcombi DNA Lyse ۽ Det PCR Kit ذريعي. پي آر پي/ڊي اين: خام ڪctionڻ ۽ انساني رت جي نمونن جو پتو لائڻ. چانور: خام مال ڪctionڻ ۽ چانورن جي نمونن جو پتو لائڻ. ب: ڪالوني PCR. پي سي آر جو ٽڪرو 700 بي پي آهي. M: TIANGEN مارڪر III |
|
س universي آھستي آھستي ٽيمپليٽس لاءِ مختلف ذريعن کان ۽ مختلف ڊگھائي سان شڪل 2. مختلف ذريعن ۽ ٽڪرن جا ٽڪرا TIANGEN استعمال ڪندي وا ويا ٽيڪ MasterMix II (A) ۽ عام ٽيڪ ملايو سپلائر TK (B) ، سپلائر TR (C) ، سپلائر V (D) ۽ سپلائر G (E). نتيجن مان ظاھر ٿئي ٿو ته TIANGEN پروڊڪٽس جي جامع ڪارڪردگي وlائڻ جي صلاحيت ، خاصيت ۽ عالمگيريت جي لحاظ کان بھترين آھي. M: TIANGEN Marker III1: Soybean genomic DNA template (120 bp)؛ 2-3: رائس جينومڪ ڊي اين اي ٽيمپليٽ (694 bp ، 2258 bp) 4: ڪپهه جينومڪ ڊي اين اي ٽيمپليٽ (200 bp) 5: ايسچريچيا ڪولي جينومڪ ڊي اين اي ٽيمپليٽ (2298 bp) 6-7: ماؤس جينوم ڊي اين اي ٽيمپليٽ (1 kb ، 2 kb) 8-10: چوٿون جينومڪ ڊي اين اي ٽيمپليٽ (1 kb ، 2 kb ، 2080 bp) 11-18: انساني جينوم ڊي اين اي ٽيمپليٽ (300 bp ، 448 bp (GC٪: 74.8٪) ، 1100 bp ، 750 bp ، 1000 bp ، 1090 bp (GC٪: 70.4٪) ، 2 kb ، 4 kb) |
|
اعلي حساسيت شڪل 3. چوٽين ۽ انساني ڊي اين اي جي مختلف حصن کي TIANGEN استعمال ڪندي وايو ويو ٽيڪ ماسٽر ميڪس II (A) ، عام ٽيڪ ميلاپ فراهم ڪندڙ V (B) ۽ فراهم ڪندڙ TK (C) ، ترتيب سان ، وlائڻ جي حساسيت کي معلوم ڪرڻ لاءِ. نتيجن مان ظاھر ٿئي ٿو ته TIANGEN پراڊڪٽ جينوم ٽيمپليٽ مان ھدف وارو ٽڪرو و1ائي سگھي ٿو 0.01 ng جيترو ، ۽ ان جي حساسيت سپلائر V ۽ TK.M جي مصنوعات جي betterيٽ ۾ بھتر آھي. : 200 ng ، 100 ng ، 50 ng ، 20 ng ، 10 ng ، 1 ng ، 0.1 ng ، 0.01 ng. |
A-1 سانچو
■ ٽيمپليٽ تي مشتمل آھي پروٽين جون نجاستون يا Taq inhibitors.
template ٽيمپليٽ جي atاھڻ مڪمل نه آھي —— مناسب طور تي وatايو وatي atاھڻ جي درجه حرارت ۽ ڊگھو atاھڻ جو وقت.
■ ٽيمپليٽ خراب ڪرڻ the ٽيمپليٽ -يهر تيار ڪريو.
A-2 پرائمر
pri پرائمر جي ناقص معيار e پرائمر کي -يھر ھرايو.
■ پرائمر تباھي —— اعلي ڪنسنٽريشن پرائمر کي بچايو نن smallي مقدار ۾. گھڻن منجمد ۽ پگھلڻ کان پاسو ڪريو يا ڊگھي عرصي تائين 4 ° C cryopreserved.
pri پرائمر جي نامناسب ڊيزائن (مثال طور پرائمر جي ڊيگھ ڪافي ناھي ، پرائمر جي وچ ۾ imeھيل ڊيمر وغيره) -ري ڊيزائين پرائمر (پرائمر ڊيمر ۽ سيڪنڊري ساخت جي avoidاھڻ کان پاسو ڪريو)
A-3 مگ2+توجه
■ مگ2+ ڪنسنٽريشن تمام گھٽ آهي ro خاص طور تي Mg و increaseايو2+ ڪنسنٽريشن: ايم پي کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.
A-4 انيلنگ جو گرمي پد
■ تيز annealing گرمي پد کي متاثر ڪري ٿو پرائمر ۽ ٽيمپليٽ جي پابند. -انيلنگ جي درجه حرارت کي گھٽايو ۽ حالت کي بهتر ڪريو 2 ° C جي درجه بندي سان.
A-5 وensionائڻ جو وقت
■ مختصر توسيع وقت extension و extensionائڻ جو وقت وايو.
Phenomena: منفي نمونا پڻ ڏيکارين ٿا ٽارگيٽ تسلسل بينڊ.
PCR جي A-1 آلودگي
target ٽارگيٽ تسلسل يا وlائڻ وارين شين جي پار آلودگي fully احتياط سان پائپ نه ڪيو و targetي ٽارگيٽ تسلسل وارو نمونو منفي نموني ۾ يا انھن کي اrليو سينٽرفيوج ٽيوب مان. ريجينٽس يا سامان پاڻمرادو beھيل ھئڻ گھرجي موجوده نيوڪليڪ ايسڊز کي ختم ڪرڻ لاءِ ، ۽ آلودگيءَ جو وجود منفي ڪنٽرول تجربن ذريعي طئي ٿيڻ گھرجي.
■ Reagent contamination liAliquot reagents ۽ اسٽور گھٽ درجه حرارت تي.
A-2 وزيراعظمr
■ مگ2+ ڪنسنٽريشن تمام گھٽ آهي ro خاص طور تي Mg و increaseايو2+ ڪنسنٽريشن: ايم پي کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.
■ نامناسب پرائمر ڊيزائن ، ۽ ٽارگيٽ تسلسل ۾ ھومولوجي آھي غير ھدفاتي تسلسل سان. -designيهر ڊيزائين ڪرڻ وارا پرائمر.
Phenomena: PCR amplification bands متضاد آھن متوقع سائيز سان ، يا ته وڏا يا نن ،ا ، يا ڪڏهن ڪڏهن specificئي مخصوص امپليفيشن بينڊ ۽ غير مخصوص امپليفيشن بينڊ.
A-1 پرائمر
pri غريب پرائمر جي خاصيت
-designيهر ڊيزائين ڪرڻ وارو پرائمر.
■ پرائمر جو ڪنسنٽريشن تمام گھڻو آھي ro مناسب طور تي وatايو وatي ڊيناتريشن جي درجه حرارت ۽ ڊگھو ڪرڻ وارو وقت.
A-2 مگ2+ توجه
Mg مگ2+ ڪنسنٽريشن تمام گھڻي آھي —— خاص طور تي Mg2+ ڪنسنٽريشن گھٽ ڪريو: Mg کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.
A-3 Thermostable polymerase
en ضرورت کان وzyيڪ انزائم جي مقدار en گھٽايو اينزيم جي مقدار کي مناسب طور تي 0.5 U جي وقفي تي.
A-4 انيلنگ جو گرمي پد
■ annealing گرمي پد تمام گھٽ آهي —— مناسب طور annealing گرمي پد و orائڻ يا adoptه-اسٽيج annealing طريقو اپنائڻ.
A-5 PCR سائيڪلون
many تمام گھڻا PCR چڪر PC PCR سائيڪلن جو تعداد گھٽايو.
A-1 پرائمرoor ناقص خاصيت the پرائمر کي -يهر ڊيزائين ڪرڻ ، پرائمر جي پوزيشن ۽ ڊيگھ تبديل ڪرڻ ان جي خاصيت و enhanceائڻ لاءِ يا نسٽ ٿيل PCR انجام ڏيو.
A-2 سانچو DNA
template ٽيمپليٽ خالص ناهي the ٽيمپليٽ کي صاف ڪريو يا ڊي اين اي ڪ purو صاف ڪرڻ جي ڪٽس سان.
A-3 مگ2+ توجه
—— ايم جي2+ ڪنسنٽريشن تمام گھڻي آھي Mg خاص طور تي Mg گھٽايو2+ ڪنسنٽريشن: ايم پي کي وايو2+ 1 mM کان 3 mM تائين رد عمل جي ھڪڙي سلسلي سان ڪنسنٽريشن 0.5 mM جي وقفي سان و Mg ۾ و Mg Mg جو تعين ڪرڻ لاءِ2+ هر ٽيمپليٽ ۽ پرائمر لاءِ توجه.
A-4 dNTP
- ڊي اين ٽي پيز جو ڪنسنٽريشن تمام گھڻو آھي - ڊي اين ٽي پي جو ڪنسنٽريشن مناسب طور تي گھٽ ڪريو
A-5 انيلنگ جو گرمي پد
oo تمام گھٽ annealing گرمي پد rop مناسب طور annealing گرمي پد ۾ اضافو
A-6 سائيڪلون
many تمام گھڻا چڪر cycle سائيڪل نمبر کي وايو
پهريون قدم آهي مناسب پوليميرس چونڊڻ جو. باقائده Taq پوليميرس 3'-5 'exonuclease سرگرمي جي کوٽ جي ڪري پروف ريڊ نٿو ٿي سگھي ، ۽ بي ترتيب ٽڪرن جي توسيع ڪارڪردگيءَ کي تمام گھٽ ڪندو. ان ڪري ، باقاعده Taq polymerase مؤثر طريقي سان ٽارگيٽ ٽڪرن کي وlائي نٿو سگھي 5 kb کان وڏو. Taq polymerase خاص ترميم سان يا highيو اعليٰ مخلص پوليمريز چونڊيو و beي ته جيئن وا extensionاري جي ڪارڪردگيءَ کي بھتر ڪري سگھجي ۽ ڊگھي ٽڪرا وlائڻ جي ضرورتن کي پورو ڪيو وي. ان کان علاوه ، ڊگھن ٽڪرن جي واl ويجھ لاءِ پڻ ضرورت آھي پرائمر ڊيزائن جي مناسب ترتيب ، ڊيناتوريشن ٽائيم ، ايڪسٽينشن ٽائيم ، بفر پي اي، ، وغيره. ٽيمپليٽ جي نقصان کي روڪڻ لاءِ ، 94 ° C تي atاھڻ جو وقت گھٽايو و 30ي 30 سيڪنڊ يا گھٽ في چڪر ۾ ، ۽ وقت و temperatureائڻ جو وقت 94 ° C تائين و ampڻ کان ا should 1 منٽ کان گھٽ ھجڻ گھرجي. ان کان علاوه ، و extensionائڻ جو گرمي پد تقريبا 68 68 ° C تي ۽ و extensionائڻ جو وقت kاھڻ 1 kb/منٽ جي شرح مطابق ڊگھي ٽڪرن جي اثرائتي ور ensure کي يقيني بڻائي سگھي ٿو.
پي سي آر وlائڻ جي غلطي جي شرح کي گھٽ ڪري سگھجي ٿو مختلف ڊي اين اي پوليميرس استعمال ڪري و highيڪ ايمانداري سان. ا allا تائين مليل س Taني طاق ڊي اين اي پوليميرسز مان ، پي ايف يو انزائم وٽ گھٽ ۾ گھٽ غلطي جي شرح ۽ س highest کان و fيڪ ايمانداري آھي (ڏسو جدول ڏسو). انزائم جي چونڊ کان علاوه ، محقق و PCيڪ گھٽ ڪري سگھن ٿا PCR ميوٽيشن جي شرح کي بهتر ڪندي رد عمل جي حالتن کي ، بشمول بفر جي جوڙجڪ کي بهتر ڪرڻ ، ٿرموسٽبل پوليميرز جي توسيع ۽ PCR سائيڪل نمبر کي بھتر ڪرڻ.
ان جي قيام کان و ourي ، اسان جو ڪارخانو ترقي ڪري رھيو آھي پھريون عالمي درجي جون شيون اصول تي عمل ڪرڻ سان
معيار جي پهرين. اسان جي پروڊڪٽس حاصل ڪئي آھي صنعت ۾ شاندار ساک ۽ نئين ۽ پراڻن گراهڪن جي وچ ۾ قابل اعتماد اعتماد.